rpcardioRational Pharmacotherapy in CardiologyРациональная Фармакотерапия в Кардиологии1819-64462225-3653«SILICEA-POLIGRAF» LLC10.20996/1819-6446-2019-15-3-343-348rpcardio-1955Research ArticleORIGINAL STUDIESОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯStudy of the Association of V640L (rs6133) Polymorphism in the Platelet P-selectin Gene with Acetylsalicylic Acid Resistance in Patients after Coronary Bypass SurgeryИзучение ассоциации полиморфизма V640L (rs6133) в гене Р-селектина с резистентностью к ацетилсалициловой кислоте у пациентов с ишемической болезнью сердца после коронарного шунтированияКосиноваА. А.KosinovaA. A.

к.м.н., ассистент, кафедра терапии Института последипломного образования

Россия, 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

 

MD, PhD, Assistant, Chair of Therapy

Partizana Zheleznyaka ul. 1, Krasnoyarsk, 660022 Russia

 

tarskihaa@mail.ruМонгушТ. С.MongushT. S.

соискатель, кафедра терапии Института последипломного образования

Россия, 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Россия, 660020, Красноярск, ул. Караульная, 45

MD, Doctoral Student, Chair of Therapy; Cardiologist

Partizana Zheleznyaka ul. 1, Krasnoyarsk, 660022 Russia

 Karaulnaya ul. 45, Krasnoyarsk, 660020 Russia

ГончаровМ. Д.GoncharovM. D.

соискатель, кафедра терапии Института последипломного образования

Россия, 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

Россия, 660020, Красноярск, ул. Караульная, 45

MD, Doctoral Student, Chair of Therapy; Laboratory Diagnosis Doctor

Partizana Zheleznyaka ul. 1, Krasnoyarsk, 660022 Russia

Karaulnaya ul. 45, Krasnoyarsk, 660020 Russia

СубботинаТ. Н.SubbotinaT. N.

к.б.н., зав. научно-практической лабораторией молекулярно-генетических методов исследования

Россия, 660041, Красноярск, просп. Свободный, 79

MD, PhD (Biology), Head of the Scientific and Practical Laboratory of Molecular Genetic Research Methods

Svobodny prosp. 79, Krasnoyarsk, 660041 Russia

СемащенкоК. С.SemashchenkoK. S.

студентка 3 курса бакалавриата, институт фундаментальной биологии и биотехнологии

Россия, 660041, Красноярск, просп. Свободный, 79

3rd Year Undergraduate Student, Institute of Fundamental Biology and Biotechnology

Svobodny prosp. 79, Krasnoyarsk, 660041 Russia

КочмареваГ. Ю.KochmarevaG. Y.

магистрантка 2 курса, институт фундаментальной биологии и биотехнологии

Россия, 660041, Красноярск, просп. Свободный, 79

2rd Year Master Student, Institute of Fundamental Biology and Biotechnology

Svobodny prosp. 79, Krasnoyarsk, 660041 Russia

ГринштейнЮ. И.GrinshteinYu. I.

д.м.н., профессор, зав. кафедрой терапии Института последипломного образования

Россия, 660022, Красноярск, ул. Партизана Железняка, 1

MD, PhD, Professor, Head of Chair of Therapy

Partizana Zheleznyaka ul. 1, Krasnoyarsk, 660022 Russia

Красноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-ЯсенецкогоРоссияKrasnoyarsk State Medical University named after Prof. V.F. Voino-YasenetskyRussian FederationКрасноярский государственный медицинский университет им. проф. В.Ф. Войно-Ясенецкого Федеральный центр сердечно-сосудистой хирургииРоссияKrasnoyarsk State Medical University named after Prof. V.F. Voino-Yasenetsky Federal Center for Cardiovascular SurgeryRussian FederationСибирский федеральный университетРоссияSiberian Federal UniversityRussian Federation201902072019153343348Copyright © Kosinova A.A., Mongush T.S., Goncharov M.D., Subbotina T.N., Semashchenko K.S., Kochmareva G.Y., Grinshtein Y.I., 20192019Косинова А.А., Монгуш Т.С., Гончаров М.Д., Субботина Т.Н., Семащенко К.С., Кочмарева Г.Ю., Гринштейн Ю.И.Kosinova A.A., Mongush T.S., Goncharov M.D., Subbotina T.N., Semashchenko K.S., Kochmareva G.Y., Grinshtein Y.I.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://www.rpcardio.online/jour/article/view/1955Aim

Aim. To study the association of V640L (rs6133) polymorphism in the P-selectin gene with acetylsalicylic acid (ASA) resistance in patients with coronary heart disease after coronary bypass surgery (CABG).Material and methods. The study included 104 patients aged 36-78 years (mean age 61.6±6.9 years) with stable angina pectoris: 61 (58.7%) patients had functional class II (according to Canadian Cardiovascular Society), 41 (39.4%) – class III and 2 (1.9%) – class IV. Atherosclerotic lesions of the coronary arteries were confirmed by coronary angiography. The antiplatelet therapy was stopped for at least 5 days before CABG. In the postoperative period, from the first day, all patients received 100 mg of ASA in enteric form, 61 patients received alone ASA therapy, 43 patients – combined antiplatelet therapy: ASA+clopidogrel (75 mg/day). The aggregation study was performed with an optical aggregometer, using 5 μM adenosinediphosphate (ADP) and 1 mM arachidonic acid inductors before CABG, on 1-3 day and on 8-10 day after surgical treatment. DNA samples were examined for the V640L (rs6133) polymorphism in the P-selectin gene by real-time polymerase chain reaction (PCR) using the allele-specific primers.

Results

Results. The frequency of the homozygous GG genotype of the rs6133 polymorphism was 84.6%; heterozygous GT genotype – 15.4%. The amplitude of aggregation with ADP before CABG, on 1-3 day and on 8-10 day after CABG for carriers of homozygotes of allele G vs carriers of the allele T were: 47.9±19.3%, 44.5±17.8%, 30.1±13.2% vs 47.9±17.1%, 46.3±16.5%, 39.6±22.0%, respectively (p=0.497, 0.441 and 0.687, respectively). The amplitude of aggregation with arachidonic acid before CABG, on 1-3 day and on 8-10 day after CABG for carriers of homozygotesof allele G vs carriers of the allele T, were: 47.9±23.2%, 24.5±21.7%, 12.3±16.3% vs 54.3±17.8%, 29.7±23.7%,  11±10.9%, respectively (p=0.416, 0.825 and 0.872, respectively). In the first 10 days of the postoperative period, 6 thrombotic events (5.7%) were observed in the study group: 2 strokes and 4 perioperative myocardial infarctions. Five events occurred in the group of patients with the GG genotype, 1 event in the group of patients with the GT genotype.Conclusion. V640L (rs6133) polymorphism in the P-selectin gene is not associated with ASA resistance in patients with coronary artery disease after CABG. The T allele of the rs6133 polymorphism is not associated with increased platelet aggregation activity after CABG and does not increase the risk of adverse events in the first 10 days after CABG.

Цель. Изучить ассоциацию полиморфизма V640L (rs6133) в гене Р-селектина с резистентностью к ацетилсалициловой кислоте (АСК) у пациентов с ишемической болезнью сердца (ИБС) после коронарного шунтирования (КШ).Материал и методы. В исследование включено 104 пациента с ИБС, стенокардией напряжения, атеросклеротическим поражением коронарных артерий, подтвержденным коронароангиографией. Из них 61 (58,7%) пациент с II функциональным классом (ФК), 41 (39,4%) пациент с III ФК и 2 (1,9%) пациента с IV ФК, в возрасте 36-78 лет (средний возраст 61,6±6,9 года). Пациенты прекращали прием антиагрегантов до КШ минимум за 5 суток. В послеоперационном периоде с первых суток всем пациентам назначалось 100 мг АСК в кишечнорастворимой форме: 61 пациент получал только терапию АСК, 43 пациента – комбинированную антиагрегантную терапию – АСК+клопидогрел (75 мг/сут). Исследование агрегации проводилось на оптическом агрегометре с использованием индукторов: аденозиндифосфата (АДФ) и арахидоновой кислоты в концентрации 5 μМ и 1 мМ, соответственно: до КШ, на 1-3 сутки и на 8-10 сутки после оперативного лечения.Образцы ДНК были исследованы на наличие полиморфизма V640L (rs6133) в гене Р-селектина с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени при использовании аллель специфичных праймеров.Результаты. Частота гомозиготного генотипа GG полиморфизма rs6133 в группе пациентов составила 84,6%; гетерозиготного генотипа GT ‒ 15,4%. Амплитуда агрегации с АДФ до КШ, на 1-3 и 8-10 сутки после КШ для группы пациентов с гомозиготным вариантом генотипа GG против группы носителей редкой аллели Т в гетерозиготном состоянии составила, соответственно: 47,9±19,3%, 44,5±17,8%, 30,1±13,2% против 47,9±17,1%, 46,3±16,5%, 39,6±22,0% (р=0,497, 0,441 и 0,687, соответственно). Амплитуда агрегации с арахидоновой кислотой до КШ, на 1-3 сутки и 8-10 сутки после КШ для группы с генотипом GG против группы GT составила соответственно: 47,9±23,2%, 24,5±21,7%, 12,3±16,3% против 54,3±17,8%, 29,7±23,7%, 11±10,9% (р=0,416, 0,825 и 0,872, соответственно). В первые 10 дней послеоперационного периода в исследуемой группе наблюдалось 6 тромботических событий (5,7%): 2 острого нарушения мозгового кро-вообращения и 4 периоперационных инфаркта миокарда. Пять событий произошло в группе пациентов с генотипом GG, 1 событие – в группе пациентов с генотипом GT.Заключение. Полиморфизм V640L (rs6133) в гене Р-селектина не ассоциирован с резистентностью к АСК у пациентов с ИБС после КШ. Редкая аллель Т исследуемого полиморфизма не ассоциирована с повышенной агрегационной активностью тромбоцитов после КШ и не приводит к увеличению рисков неблагоприятных событий в первые 10 дней после КШ.

коронарное шунтированиегенетические полиморфизмырезистентностьацетилсалициловая кислотаrs6133Р-селектинcoronary bypass graftinggenetic polymorphismsresistanceacetylsalicylic acidrs6133P-selectinThe reported study was funded by Russian Foundation for Basic Research, Government of Krasnoyarsk Territory, Krasnoyarsk Regional Fund of Science as a part of the research project: “Antiplatelet therapy personification in patients with coronary heart disease (CHD) depending on the level of P-selectin gene expression, the intensity of intercellular interaction and inflammation”ReferencesMohr F.W., Morice M.C., Кappetein A.P., et al. Coronary artery bypass graft surgery vs. percutaneous coronary intervention in patients with three-vessel disease and left main coronary disease: 5-year follow-up of the randomised, clinical SYNTAX trial. Lancet. 2013;381:629-38. DOI:10.1016/S0140-6736(13)60141-5.Mohr F.W., Morice M.C., Кappetein A.P., et al. Coronary artery bypass graft surgery vs. percutaneous coronary intervention in patients with three-vessel disease and left main coronary disease: 5-year follow-up of the randomised, clinical SYNTAX trial. Lancet. 2013;381:629-38. DOI:10.1016/S0140-6736(13)60141-5.McCullough P.A., Vasudevan A., Sathyamoorthy M., et al. Urinary 11-Dehydro-Thromboxane B2 and Mortality in Patients With Stable Coronary Artery Disease. Am J Cardiol. 2017;119(7):972-7. DOI:10.1016/j.amjcard.2016.12.004.McCullough P.A., Vasudevan A., Sathyamoorthy M., et al. Urinary 11-Dehydro-Thromboxane B2 and Mortality in Patients With Stable Coronary Artery Disease. Am J Cardiol. 2017;119(7):972-7. DOI:10.1016/j.amjcard.2016.12.004.Гринштейн Ю.И., Косинова А.А., Гринштейн И.Ю., и др. Клиниколабораторные особенности пациентов с ишемической болезнью сердца, резистентных к Ацетилсалициловой кислоте, в периоперационном периоде коронарного шунтирования: результаты открытого проспективного исследования. Рациональная Фармакотерапия в Кардиологии.2016;12(3):265-71. DOI:10.20996/1819-6446-2016-12-3-265-271.Grinshtein Y.I., Kosinova A.A., Grinshtein I.Y., et al. Clinical and laboratory features of patients with ischemic heart disease resistant to acetylsalicylic acid in the perioperative period of coronary artery bypass surgery: results of an open prospective study. Rational Pharmacotherapy in Cardiology. 2016;12(3):265-71 (In Russ.) DOI:10.20996/1819-6446-2016-12-3-265-271.Johnston G.I., Bliss B.A., Newman P.J., McEver P.J. Structure of the human gene encoding granule membrane protein-140, a member of the selectin family of the adhesion receptors for leukocytes. J Biol Chem. 1990;265:21381-5.Johnston G.I., Bliss B.A., Newman P.J., McEver P.J. Structure of the human gene encoding granule membrane protein-140, a member of the selectin family of the adhesion receptors for leukocytes. J Biol Chem. 1990;265:21381-5.Johnson R.C., Mayadas T.N., Frenette P.S., et al. Blood cell dynamics in P-selectin-deficient mice. Blood. 1995;86:1106-14.Johnson R.C., Mayadas T.N., Frenette P.S., et al. Blood cell dynamics in P-selectin-deficient mice. Blood. 1995;86:1106-14.Johnson-Tidey R.R., McGregor J.L., Taylor P.R., Poston R.N. Increase in the adhesion molecule P-selectin in endothelium overlying atherosclerotic plaques. Coexpression with intercellular adhesion molecule-1. Am J Pathol. 1994;144:952-61.Johnson-Tidey R.R., McGregor J.L., Taylor P.R., Poston R.N. Increase in the adhesion molecule P-selectin in endothelium overlying atherosclerotic plaques. Coexpression with intercellular adhesion molecule-1. Am J Pathol. 1994;144:952-61.Tschoepe D., Rauch, U., Schwippert B. Platelet-leukocyte-crosstalk in diabetes mellitus. Horm. Metab Res. 1997;29:631-5. DOI:10.1055/s-2007-979115.Tschoepe D., Rauch, U., Schwippert B. Platelet-leukocyte-crosstalk in diabetes mellitus. Horm. Metab Res. 1997;29:631-5. DOI:10.1055/s-2007-979115.Ikeda H., Takajo Y., Ichiki K., et al. Increased soluble form of P-selectin in patients with unstable angina. Circulation. 1995;92:1693-6.Ikeda H., Takajo Y., Ichiki K., et al. Increased soluble form of P-selectin in patients with unstable angina. Circulation. 1995;92:1693-6.Ishiwata S., Tukada T., Nakanishi S., et al. Postangioplasty restenosis: platelet activation and the coagulation-fibrinolysis system as possible factors in the pathogenesis of restenosis. Am Heart J. 1997;133:387-92. DOI:10.1177/1538574416638759.Ishiwata S., Tukada T., Nakanishi S., et al. Postangioplasty restenosis: platelet activation and the coagulation-fibrinolysis system as possible factors in the pathogenesis of restenosis. Am Heart J. 1997;133:387-92. DOI:10.1177/1538574416638759.Kaikita K., Ogawa H., Yasue H., et al. Soluble P-selectin is released into the coronary circulation after coronary spasm. Circulation. 1995;92:1726-30. DOI:10.1161/01.CIR.92.7.1726.Kaikita K., Ogawa H., Yasue H., et al. Soluble P-selectin is released into the coronary circulation after coronary spasm. Circulation. 1995;92:1726-30. DOI:10.1161/01.CIR.92.7.1726.Бернс С.А., Шмидт Е.А., Юхно Е.С., и др. Влияние дисфункции эндотелия на прогноз у больных с острым коронарным синдромом без подъема сегмента ST. Кардиология. 2015;4(55):14-8.Burns S.A., Schmidt E.A., Yukhno E.S., et al. Effect of endothelial dysfunction on the prognosis in patients with acute coronary syndrome without ST elevation. Kardiologiia. 2015;4(55): 14-8 (In Russ.)Бернс С.А., Шмидт Е.А., Киприна Е.С., и др. Предикторы неблагоприятных коронарных событий у больных острым коронарным синдромом с подъемом сегмента ST, подвергшихся чрескожным коронарным вмешательствам. Кардиология. 2010;7(50):21-5.Burns S.A., Schmidt E.A., Kiprina E.S., et al. Predictors of adverse coronary events in patients with acute coronary syndrome with ST-segment elevation, undergone percutaneous coronary interventions. Kardiologiia. 2010;7(50):21-5 (In Russ.)Gurbel P.A., Bliden K.P., Hiatt B.I. et al. Clopidogrel for coronary stenting: response variability, drug resistance, and the effect of pretreatment platelet reactivity. Circulation 2003;107:2908-13. DOI:10.1161/01.CIR.0000072771.11429.83.Gurbel P.A., Bliden K.P., Hiatt B.I. et al. Clopidogrel for coronary stenting: response variability, drug resistance, and the effect of pretreatment platelet reactivity. Circulation 2003;107:2908-13. DOI:10.1161/01.CIR.0000072771.11429.83.Kaur R., Singh J., Kaur M. Structural and functional impact of SNPs in P-selectin gene: A comprehensive in silico analysis. Open Life Sciences; 2017;12(1):19-33. DOI:10.1515/biol-2017-0003.Kaur R., Singh J., Kaur M. Structural and functional impact of SNPs in P-selectin gene: A comprehensive in silico analysis. Open Life Sciences; 2017;12(1):19-33. DOI:10.1515/biol-2017-0003.Herrmann S., Ricard S., Nicaud V. The P-Selectin Gene is Highly Polymorphic: Reduced Frequency of the Pro715 Allele Carriers in Patients with Myocardial Infarction In: Herrmann S., Ricard S., Nicaud V. Hum Mol Genet. 1998;7(8):1277-84. DOI:10.1093/hmg/7.8.1277.Herrmann S., Ricard S., Nicaud V. The P-Selectin Gene is Highly Polymorphic: Reduced Frequency of the Pro715 Allele Carriers in Patients with Myocardial Infarction In: Herrmann S., Ricard S., Nicaud V. Hum Mol Genet. 1998;7(8):1277-84. DOI:10.1093/hmg/7.8.1277.Zhou D.H., Wang Y., Hu W.N., et al. SELP genetic polymorphisms may contribute to the pathogenesis of coronary heart disease and myocardial infarction: a meta-analysis. Mol Biol Rep. 2014;41(5):3369-80. DOI:10.1007/s11033-014-3199-1.Zhou D.H., Wang Y., Hu W.N., et al. SELP genetic polymorphisms may contribute to the pathogenesis of coronary heart disease and myocardial infarction: a meta-analysis. Mol Biol Rep. 2014;41(5):3369-80. DOI:10.1007/s11033-014-3199-1.Montalescot G., Sechtem U, Achenbach S., et al. ESC Committee for Practice Guidelines. ESC guidelines on the management of stable coronary artery disease. Eur Heart J. 2013;34:2949-3003. DOI:10.1093/eurheartj/eht296.Montalescot G., Sechtem U, Achenbach S., et al. ESC Committee for Practice Guidelines. ESC guidelines on the management of stable coronary artery disease. Eur Heart J. 2013;34:2949-3003. DOI:10.1093/eurheartj/eht296.Патент 2413953 РФ: МПК G01N 33/86. Гринштейн Ю.И., Филоненко И.В., Савченко А.А. и др. Способ диагностики резистентности к ацетилсалициловой кислоте. Патент 2009131242/15; 17.08.2009. Бюллетень №7.Patent 2413953 of the Russian Federation: IPC G01N 33/86. Grinshtein Y.I., Filonenko I.V., Savchenko A.A. et al. A method for the diagnosis of resistance to acetylsalicylic acid. Patent 2009131242/15; 08/17/2009. Bulletin №7 (In Russ.)Bugert P., Vosberg M., Entelmann M., et al. Polymorphisms in the P-selectin (CD62P) and P-selectin glycoprotein ligand-1 (PSGL-1) genes and coronary heart disease. Clin Chem Lab Med.2004;42(9):997-1004. DOI:10.1515/CCLM.2004.202.Bugert P., Vosberg M., Entelmann M., et al. Polymorphisms in the P-selectin (CD62P) and P-selectin glycoprotein ligand-1 (PSGL-1) genes and coronary heart disease. Clin Chem Lab Med.2004;42(9):997-1004. DOI:10.1515/CCLM.2004.202.Morris D.L., Graham R.R., Erwig L.P., et al. Variation in the upstream region of P-Selectin (SELP) is a risk factor for SLE. Genes Immun. 2009;10(5):404-13. DOI:10.1038/gene.2009.17.Morris D.L., Graham R.R., Erwig L.P., et al. Variation in the upstream region of P-Selectin (SELP) is a risk factor for SLE. Genes Immun. 2009;10(5):404-13. DOI:10.1038/gene.2009.17.Fenoglio C., Scalabrini D., Piccio L., et al. Candidate gene analysis of selectin cluster in patients with multiple sclerosis. J Neurol. 2009;256(5):832-3. DOI:10.1007/s00415-009-5016-7.Fenoglio C., Scalabrini D., Piccio L., et al. Candidate gene analysis of selectin cluster in patients with multiple sclerosis. J Neurol. 2009;256(5):832-3. DOI:10.1007/s00415-009-5016-7.Podgoreanu M.V., White W.D., Morris R.W., et al.; Perioperative Genetics and Safety Outcomes Study (PEGASUS) Investigative Team. Inflammatory gene polymorphisms and risk of postoperative myocardial infarction after cardiac surgery. Circulation. 2006;114(1 Suppl):I275-81. DOI:10.1161/CIRCULATIONAHA.105.001032.Podgoreanu M.V., White W.D., Morris R.W., et al.; Perioperative Genetics and Safety Outcomes Study (PEGASUS) Investigative Team. Inflammatory gene polymorphisms and risk of postoperative myocardial infarction after cardiac surgery. Circulation. 2006;114(1 Suppl):I275-81. DOI:10.1161/CIRCULATIONAHA.105.001032.Volcik К.А., Ballantyne С.М., Coresh J., et al. Specific P-selectin and P-selectin glycoprotein ligand-1 genotypes/haplotypes are associated with risk of incident CHD and ischemic stroke: The Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) study. Atherosclerosis. 2007;195:e76-e82. DOI:10.1016/j.atherosclerosis.2007.03.007.Volcik К.А., Ballantyne С.М., Coresh J., et al. Specific P-selectin and P-selectin glycoprotein ligand-1 genotypes/haplotypes are associated with risk of incident CHD and ischemic stroke: The Atherosclerosis Risk in Communities (ARIC) study. Atherosclerosis. 2007;195:e76-e82. DOI:10.1016/j.atherosclerosis.2007.03.007.Zee R.Y.L., Cook N.R., Cheng S., et al. Polymorphism in the P-selectin and interleukin-4 genes as determinants of stroke: a population-based, prospective genetic analysis. Human Molecular Genetics. 2004;13(4):389-96. DOI:10.1093/hmg/ddh039.Zee R.Y.L., Cook N.R., Cheng S., et al. Polymorphism in the P-selectin and interleukin-4 genes as determinants of stroke: a population-based, prospective genetic analysis. Human Molecular Genetics. 2004;13(4):389-96. DOI:10.1093/hmg/ddh039.Grinshtein Y.I., Kosinova A.A., Grinshtein I.Y., et al. The prognostic value of combinations of genetic polymorphisms in the ITGB3, ITGA2, and CYP2C19∗2 genes in predicting cardiovascular outcomes after coronary bypass grafting. Testing and Molecular Biomarkers. 2018;22(4):259-65. DOI:10.1089/gtmb.2017.0177.Grinshtein Y.I., Kosinova A.A., Grinshtein I.Y., et al. The prognostic value of combinations of genetic polymorphisms in the ITGB3, ITGA2, and CYP2C19∗2 genes in predicting cardiovascular outcomes after coronary bypass grafting. Testing and Molecular Biomarkers. 2018;22(4):259-65. DOI:10.1089/gtmb.2017.0177.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.